Главная » 2014»Июль»17 » Скачать Использование эксплантатов трахеи куриных эмбрионов и цыплят для изучения возбудителей инфекционных респираторных болезней бесплатно
03:17
Скачать Использование эксплантатов трахеи куриных эмбрионов и цыплят для изучения возбудителей инфекционных респираторных болезней бесплатно
Использование эксплантатов трахеи куриных эмбрионов и цыплят для изучения возбудителей инфекционных респираторных болезней птиц
Диссертация
Автор: Чупина, Ольга Андреевна
Название: Использование эксплантатов трахеи куриных эмбрионов и цыплят для изучения возбудителей инфекционных респираторных болезней птиц
Справка: Чупина, Ольга Андреевна. Использование эксплантатов трахеи куриных эмбрионов и цыплят для изучения возбудителей инфекционных респираторных болезней птиц : диссертация кандидата биологических наук : 03.00.06 / Чупина Ольга Андреевна; [Место защиты: Федер. центр охраны здоровья животных] - Владимир, 2009 - Количество страниц: 142 с. ил. Владимир, 2009 142 c. :
Объем: 142 стр.
Информация: Владимир, 2009
Содержание:
ВВЕДЕНИЕ
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ , Ю
11 Определение болезни, история изучения
12 Эпизоотическая ситуация по ИБК, экономический ущерб
13 Организмы, восприимчивые к вирусу ИБК
14 Филогенетическая характеристика вируса ИБК
15 Морфология вируса ИБК
151 Поверхностные структуры
152 Геном
16 Механизм репликации вируса ИБК
17 Ранний патогенез ИБК
18 Тканевой тропизм возбудителя и клинические проявления инфекции ИБК
19 Патологоанатомические и гистологические изменения у птиц при заболевании ИБК
110 Антигенные свойства вируса ИБК
111 Природа иммунного ответа при ИБК
1111 Особенности иммунной системы кур
1112 Формирование иммунного ответа при ИБК
1113 Локальный иммунитет при ИБК
112 Выделение вируса
1121 Сбор образцов для выделения вируса ИБК
1122 Системы для выделения вируса ИБК 3 8 113 Трахеальная органная культура
114 Использование ТОК для исследования прочих возбудителей
Введение:
Актуальность темы. Инфекционные болезни птиц, протекающие с признаками поражения респираторного тракта, являются1 актуальной проблемой для современного промышленного птицеводства. К наиболее распространенным заболеваниям относится инфекционный бронхит кур (ИБК), борьба с которым осложнена тем, что вызывающий его коронавирус способен проявлять высокую изменчивость, что приводит к появлению штаммов с новыми антигенными свойствами. Важным условием эффективной профилактики ИБК является соответствие антигенных свойств полевых изолятов возбудителя и штаммов, используемых для изготовления вакцины. Это обусловливает необходимость постоянного изучения выделенных возбудителей.
Определение антигенных свойств вирусов с использованием лабораторных моделей, таких как развивающиеся куриные эмбрионы (КЭ) или клеточные культуры, затруднено из-за продолжительной адаптации полевого вируса к указанным биологическим системам. За это время могут изменяться биологические и антигенные свойства штамма. Специфическое патогенное действие вируса на КЭ проявляется только после проведения 5-10 и более слепых пассажей, что удлиняет время выделения и затрудняет типирование вируса в реакции нейтрализации (РН). Некоторые штаммы вируса ИБК даже после продолжительного пассирования в КЭ не проявляют четкого эмбриопатического действия, что затрудняет детекцию и количественный учет вируса. Одной из альтернатив КЭ является выделение вируса ИБК в переживающих эксплантатах трахеи, где активная репликация вируса и проявление его цитопатического действия происходит уже в первом пассаже. Это значительно ускоряет и удешевляет процесс исследования, а также позволяет избегать изменений свойств вируса.
Применение переживающих эксплантатов трахеи куриных эмбрионов и цыплят - трахеальной органной культуры (ТОК) - для вирусовыделения и серологических исследований рекомендовано МЭБ и широко используется для исследования вируса ИБК. С этой целью практикуются различные способы ее приготовления и использования, которые, как правило, в публикациях иностранных авторов описаны недостаточно подробно, и в связи с этим затруднена воспроизводимость полученных результатов (60, 82, 107).
Кроме этого, имеются сообщения о высокой чувствительности ТОК к другим инфекционным агентам, вызывающим респираторные болезни птиц (63, 139).
Недостаточная изученность проблемы получения и практического использования ТОК послужила основанием для проведения комплексных исследований в этом направлении.
Цель и задачи исследования. Основной целью данной работы являлось обоснование использования переживающих эксплантатов трахеи куриных эмбрионов и цыплят для выделения и изучения биологических и иммунологических особенностей вируса инфекционного бронхита кур и других инфекционных возбудителей респираторных болезней птиц.
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
• на основе литературных данных проанализировать эпизоотическую ситуацию по ИБК в мире и в России;
• оптимизировать методику приготовления и поддержания органной культуры трахеи куриных эмбрионов и цыплят;
• определить чувствительность трахеальной органной культуры к различным инфекционным агентам, вызывающим респираторные расстройства у птиц;
• разработать методику титрования вируса инфекционного бронхита кур и возбудителей других болезней в трахеальной органной культуре;
• разработать методику типирования вируса инфекционного бронхита кур с использованием переживающих эксплантатов трахеи;
• оценить биологические свойства четырех изолятов вируса ИБК, встречающихся в России, в трахеальной органной культуре;
• разработать метод оценки безвредности и иммуногенности вакцин с t учетом сохранения цилиарной активности в эксплантатах трахеи.
Научная новизна исследований. В результате проведенных нами исследований: впервые в России разработана методика приготовления, поддержания и использования трахеальной органной культуры куриных эмбрионов и цыплят для выделения и исследования биологических свойств возбудителей респираторных заболеваний птиц;
• определена чувствительность ТОК к вирусам ИБК, ньюкаслской болезни (НБ), вирусу инфекционного ларинготрахеита (ИЛТ), пневмовирусу птиц (ПВП), аденовирусу 4 птиц, возбудителям респираторного микоплазмоза и микоплазмозного синовита птиц;
• разработана методика титрования вышеуказанных инфекционных агентов;
• разработана методика оценки антигенного родства штаммов и изолятов вируса ИБК в реакции нейтрализации (РН) в ТОК;
• предложен метод оценки безвредности и иммуногенности вакцин против ИБК.
Практическая значимость исследований. Практическое значение работы состоит в том, что разработаны, одобрены ученым советом и утверждены директором ФГУ «Федеральный центр охраны здоровья животных»:
• «Методические указания по выделению, титрованию и оценке антигенного родства вариантов вируса инфекционного бронхита кур в трахеальной органной культуре», 2006 г.;
• «Методические указания по приготовлению и поддержанию трахеальной органной культуры куриных эмбрионов и цыплят», 2006 г.
Трахеальная органная культура использована для выделения отечественных штаммов изолятов вируса ИБК «Щелковский», «IBV663-07» и оценки биологических и серологических свойств штаммов «Калужский», «Таганрогский», изолятов «Щелковский», «IBV663-07», которые были использованы для создания полиштаммной вакцины против ИБК. Оценена патогенность изолятов «Щелковский» и «IBV663-07» вируса ИБК. Результаты научных исследований вошли в следующие нормативные документы, одобренные ученым советом и утвержденные директором ФГУ «Федеральный центр охраны здоровья животных»:
• СТО «Вакцина против инфекционного бронхита кур полиштаммная инактивированная эмульсионная», 2006 г.;
• промышленный регламент на производство вакцины против инфекционного бронхита кур полиштаммной инактивированной эмульсионной», 2006 г.
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ I
