Главная » 2014»Сентябрь»2 » Скачать Механизм развития инфекции, вызываемой бациллой турингиензис и влияние бактериальных метаболитов на организм личинок большой бесплатно
04:16
Скачать Механизм развития инфекции, вызываемой бациллой турингиензис и влияние бактериальных метаболитов на организм личинок большой бесплатно
Механизм развития инфекции, вызываемой бациллой турингиензис и влияние бактериальных метаболитов на организм личинок большой восковой моли
Диссертация
Автор: Дзю, Елизавета Леонидовна
Название: Механизм развития инфекции, вызываемой бациллой турингиензис и влияние бактериальных метаболитов на организм личинок большой восковой моли
Справка: Дзю, Елизавета Леонидовна. Механизм развития инфекции, вызываемой бациллой турингиензис и влияние бактериальных метаболитов на организм личинок большой восковой моли : диссертация кандидата биологических наук : 16.00.03, 03.00.09 / Дзю Елизавета Леонидовна; [Место защиты: Ин-т эксперим. ветеринар. Сибири и Дал. Востока] Новосибирск, 2007 123 c. : 61 07-3/1306
Объем: 123 стр.
Информация: Новосибирск, 2007
Содержание:
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
11 Характеристика большой восковой моли (Galleria mellonella)
12 Особенности биологии большой восковой моли
13 Поражение личинками большой восковой моли пчелиных семей
14 Существующие меры борьбы с личинками большой восковой моли
141 Биопрепараты на основе энтомопатогенных бактерий бациллы турингиензис
1411 Основные биопрепараты против чешуекрылых насекомых
ГЛАВА 2 Бацилла турингиензис {Bacillus thuringiensis)
21 Токсины и вторичные метаболиты бациллы турингиензис
22 Гидролитические ферменты
221 ФосфолипазаС
222 Вегетативный инсектицидный белок Vip3A
223 Протеолитические ферменты
224 Хитиназа
23 Бактериоцины
231 Бактериоцины грамотрицательных и грамположительных бактерий
232 Свойства бактериоцинов
24 Антиоксидантная система насекомых
241 Ферментативные антиоксиданты
242 Неферментативные антиоксиданты
25 Детоксицирующие ферменты
251 Микросомальные монооксигеназы
252 Неспецифические эстеразы
253 Глутатион-8-трансферазы
254 Влияние инфекций на активность детоксицирующих ферментов
ГЛАВА 3 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
31 Объекты исследования
32 Получение метаболитов бациллы турингиензис (белковые фракции) из культуральной жидкости
33 Определение рН стабильности белковых фракций
34 Определение бактериостатической активности белковых фракций
35 Заражение личинок большой восковой моли бациллами турингиензис
36 Отбор гемолимфы из среднего кишечника личинок большой восковой моли и приготовление гомогената
37 Определение активности супероксиддисмутазы в среднем кишечнике личинок большой восковой моли
38 Определение активности каталазы в среднем кишечнике личинок большой восковой моли
39 Определение активности и спектра неспецифических эстераз в гемолимфе и среднем кишечнике личинок большой восковой моли
310 Определение активности глутатион-Б-трансферазы в гемолимфе и среднем кишечнике личинок большой восковой моли
311 Определение тиолсодержащих соединений в гемолимфе и среднем кишечнике личинок большой восковой моли
312 Определение концентрации белка в гемолимфе и среднем кишечнике личинок большой восковой моли
313 Статистическая обработка экспериментальных данных
ГЛАВА 4 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
41 Механизм развития инфекции, вызываемой бациллой турингиензис (штамм Р-2), в организме личинок большой восковой моли
42 Активность и спектр неспецифических эстераз при бактериозе личинок большой восковой моли
ГЛАВА 5 Механизм действия метаболитов (белковые фракции) бациллы турингиензис (штамм Р-2) на личинок большой восковой моли
51 Характеристика метаболитов (белковые фракции) бациллы турингиензис
52 Влияние метаболитов (белковые фракции) бациллы турингиензис на живую массу большой восковой моли
521 Активность антиоксидантов в среднем кишечнике большой восковой моли при скармливании метаболитов (белковые фракции) бациллы турингиензис
5211 Активность супероксиддисмутазы и каталазы
5212 Концентрация тиолсодержащих соединений в гемолимфе и кишечнике личинок большой восковой моли
522 Активность детоксицирующих ферментов и глутатион-Б-трансфераз в среднем кишечнике и гемолимфе личинок большой восковой моли при скармливании метаболитов (белковые фракции) бациллы турингиензис
5221 Активность неспецифических эстераз
ОБСУЖДЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
Введение:
Актуальность темы. За последние 30-40 лет в нашей стране и за рубежом проведено много исследований, направленных на борьбу с болезнями животных. Несмотря на это, дальнейшее изучение особенностей развития целого ряда болезней животных и мер борьбы с ними имеет большую актуальность, важное научное и практическое значение. Одной из таких патологий является поражение пчелиных семей, вызываемое личинками большой восковой моли.
Личинки большой восковой моли в отдельные годы причиняют пчеловодству в Западной Сибири большой вред, который выражается в массовой гибели пчелиных семей [Столбов, 1996; Огурцов, 2003; Риб, 2006].
Наиболее перспективным методом в борьбе с личинками большой восковой моли является использование биологических препаратов, обеспечивающих повышение эффективности ведения пчеловодства. Применение биопрепаратов основано на использовании продуктов жизнедеятельности отдельных живых организмов (грибы, микроорганизмы и др.), обладающих антибиотической и бактерицидной способностью.
Отмечено, что многие бактерии обладают высокой патогенностью по отношению к насекомым, а при определенных условиях вызывают острые бактериозы [Штейнхауз, 1952; Бурцева и др., 2001]. Патогенными для насекомых могут быть как грамотрицательные, так и грамположительные бактерии. Почти все патогенные для насекомых бактерии относятся к родам Bacillales, Clostridiales, Eubacteriales и Pseudomonodales [Штейнхауз, 1952].
Начиная с 50-х годов XX века, бациллы турингиензис {Bacillus thuringiensis) используют для регуляции численности насекомых. Высокой эффективностью при борьбе с личинками большой восковой моли обладает биопрепарат энтобактерин на основе спорово-кристаллического комплекса бациллы турингиензис, созданный во Всесоюзном научно-исследовательском институте защиты растений [Федоринчик, 1974]. Смертность личинок при опрыскивании пчелиных сот 3%-ной свежеприготовленной суспензией этого препарата достигает 90% [Федоринчик, 1974; Столбов, 1996]. Однако, механизм развития инфекции в организме личинок большой восковой моли под действием бациллы турингиензис, а также влияние бактериальных метаболитов на организм личинок до проведения наших исследований не были изучены. Поэтому изучение данной проблемы весьма актуально и может способствовать созданию новых относительно дешевых, экономически выгодных биопрепаратов на основе бациллы турингиензис.
Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы явилось изучение механизма развития инфекции, вызываемой бациллой турингиензис и влияния бактериальных метаболитов на организм личинок большой восковой моли.
Для достижения указанной цели необходимо было решить следующие задачи:
1. Изучить механизм развития инфекции в организме личинок большой восковой моли под действием спорокристаллической смеси бациллы турингиензис (штамм Р-2);
2. Выявить влияние бактериальных метаболитов бациллы турингиензис на организм личинок большой восковой моли;
3. Показать механизм действия детоксицирующих и антиоксидантных ферментов, содержащихся в гемолимфе и кишечнике личинок большой восковой моли на их выживаемость.
Научная новизна. Получены новые данные об изменении детоксицирующих ферментов (неспецифических эстераз), активности антиоксидантов - супероксиддисмутазы, каталазы, глутатион-8-трансферазы и концентрации тиолсодержащих веществ при развитии бактериальной инфекции в организме личинок большой восковой моли. Показан механизм развития инфекции в организме личинок большой восковой моли, вызываемой бациллой турингиензис. Впервые изучена характеристика метаболитов бациллы турингиензис (белковые фракции), а также их влияние на организм большой восковой моли. Установлено, что при развитии бактериальной инфекции, вызванной бациллой турингиензис, происходит изменение баланса "оксиданты-антиоксиданты" в гемолимфе и кишечнике личинок большой восковой моли, что сопровождается их высокой смертностью. Показано, что ферментативные и неферментативные компоненты антиоксидантной системы предотвращают разрушение высокореакционных радикалов в гемолимфе, кишечнике личинок большой восковой моли и способствуют их выживаемости.
Теоретическая и практическая значимость. Результаты, полученные в ходе исследований, расширяют научные знания, касающиеся механизма развития инфекции в организме личинок большой восковой моли под действием бациллы турингиензис и могут служить основой для совершенствования инсектицидных препаратов с использованием новых бактериальных метаболитов, нарушающих баланс "оксиданты-антиоксиданты" у насекомых.
Апробация полученных результатов. Материалы диссертации были представлены на Сибирской зоологической конференции (Новосибирск, сентябрь 2004), на конференции "Биология микроорганизмов и их научно-практическое использование" (Иркутск, октябрь 2004), на 38th Annual Meeting of the Society for Invertebrate Pathology (Аляска, август 2005), на II Межрегиональной научной конференции паразитологов Сибири и Дальнего Востока (Новосибирск, сентябрь 2005).
Публикация результатов исследований. По теме диссертации опубликованы 7 печатных работ в сборниках научных трудов, в том числе в журнале «Сибирский вестник сельскохозяйственной науки» и других изданиях.
Внедрение результатов исследования. Материалы диссертации используются при обучении студентов на факультете ветеринарной медицины ФГО ВПО НГАУ.
Основные положения, выносимые на защиту.
1. Механизм развития инфекции в организме личинок большой восковой моли под действием спорокристаллической смеси бациллы турингиензис (штамм Р-2);
2. Влияние бактериальных метаболитов бациллы турингиензис на организм личинок большой восковой моли;
3. Механизм действия детоксицирующих и антиоксидантных ферментов, содержащихся в гемолимфе и кишечнике личинок большой восковой моли на их выживаемость.
