Главная » 2014»Сентябрь»19 » Скачать Репаративная регенерация периферических нервов крыс после механической альтерации и фармакологической модификации. Архипова, бесплатно
07:40
Скачать Репаративная регенерация периферических нервов крыс после механической альтерации и фармакологической модификации. Архипова, бесплатно
Репаративная регенерация периферических нервов крыс после механической альтерации и фармакологической модификации
Диссертация
Автор: Архипова, Елана Геннадиевна
Название: Репаративная регенерация периферических нервов крыс после механической альтерации и фармакологической модификации
Справка: Архипова, Елана Геннадиевна. Репаративная регенерация периферических нервов крыс после механической альтерации и фармакологической модификации : диссертация кандидата биологических наук : 03.00.13 / Архипова Елена Геннадиевна; [Место защиты: Нижегор. гос. ун-т им. Н.И. Лобачевского] Нижний Новгород, 2007 101 c. : 61 07-3/1558
Объем: 101 стр.
Информация: Нижний Новгород, 2007
Содержание:
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
11 Физиология процессов дегенерации и регенерации травмированного нерва
111 Валлеровская дегенерация
112 Состояние нейронов спинномозгового узла после травмы
113 Скорость процессов дегенерации в травмированных нервах
114 Регенерация нервных волокон
12 Применение пчелиного яда и экзогенных убихинонов в биологии и медицине
121 Экзогенные убихиноны
122 Пчелиный яд
ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
ГЛАВА 3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ
ОБСУЖДЕНИЕ
31 Исследование восстановления характеристик вызванных потенциалов после пережатия нерва
32 Исследование регенерации нервных волокон пережатого нерва гистологическими методами
33 Исследование динамики посттравматических процессов в спинномозговых узлах L3 и L4
34 Модификация процесса репаративной регенерации кожного нерва при воздействиеи убихинона Q-10 и пчелиного яда
Введение:
Актуальность проблемы. Проблема восстановления функций при повреждении периферических нервов в клинической медицине определяется стойким характером расстройства движений, чувствительности и вегетативно-трофических нарушений, развивающихся вслед за поражением нервного ствола, длительными сроками и не всегда удовлетворительными результатами лечения больных (Челышев, 2006; Fugleholm, Schmalburg, Krarup, 2000). Наиболее частыми формами травматического повреждения нервов, возникающими вследствие техногенного травматизма на производстве, при дорожно-транспортных происшествиях, в ходе военных действий, являются размозжение, ушиб, растяжение, а также сдавление с наличием или отсутствием разрыва нервного ствола. Однако эффективность репарации структуры и функции поврежденной ткани с применением лечебных мероприятий и лекарственных средств остается относительно низкой. Это во многом связано с малой изученностью динамики регенерации нервов после травмы. Для исследования воздействия модулирующих средств на посттравматический процесс необходимы более полные данные о динамике репаративной регенерации поврежденного нерва. Клиницистов интересует полнота морфологического и функционального восстановления нервов (Сотников, 1995). Количественные параметры регенеративных и дегенеративных процессов, происходящих в периферических нервах после альтерации пережатием, представленные в литературе, весьма противоречивы (Hamilton, Fredman, 1998; Swett, Hong, Miller, 1995; Olivera, Mazzer, Barbieri et al., 2001; Kamijo, Kojama, Oikawa et al., 2003; Рагинов, 2006; и др.). Это может быть связано с различием в условиях осуществления альтерации нерва. В литературе, посвященной исследованию деструктивных и регенеративных процессов, идущих в периферических нервах после пережатия практически нет точных указаний на условия осуществления травмы нерва, хотя вероятно, динамика этих процессов зависят от таких факторов как длительность осуществления пережатия, сила давления, размер травмы. В последнее время некоторые исследователи осуществляют стандартизацию условий проведения пережатия. А именно, Beer G. М., Steurer J., Meyer V.E. (2001) сконструировали и описали в статье «Standardizing nerve crushes with a non-serrated clamp» зажим для осуществления дозированного пережатия нерва, позволяющий воздействовать на нерв с определенной силой.
Olivera Е. F., Mazzer N., Barbieri С. N., Selli М. (2001) провели исследование посттравматических процессов в седалищном нерве крыс после пережатия с различной силой давления (100 г., 500 г., 15000 г.) и при стандартных размерах травмы (5 мм) и времени воздействия (10 мин.).
Актуальным является вопрос о темпах и характере репаративной регенерации периферических нервов в зависимости от степени тяжести травмы.
Учитывая важность проблемы, в современной медицине ведется активный поиск эффективных терапевтических средств для стимуляции регенеративных процессов после травмы. Среди различных классов физиологически активных веществ в этом плане представляют интерес природные соединения. Широко известны терапевтические эффекты пчелиного яда в отношении нервной, сердечно-сосудистой и иммунной систем (Крылов, 1995; Кривцов и др., 2004). При этом вводимая доза яда во многом может определять физиологический эффект. Так, нейротропные эффекты яда могут проявляться не только поражением миелиновой оболочки от токсических доз (Орлов, 1972), но и, наоборот, в малых дозах стимулировать миелинизацию нервных волокон мозга крыс в модельных опытах с их демиелинизацией (Кочеткова, 1998; Кривопалов, 1998).
При травмировании нерва его регенерация осложняется развитием ишемии и гипоксии из-за повреждения мелких сосудов в месте травмы. Известно, что гипоксические состояния сопутствуют практически любой патологии (Лукьянова, 1991). В последнее время экспериментально и клинически обоснована возможность использования в качестве антигипоксического средства при ишемических состояниях организма компонента дыхательной цепи митохондрий - убихинона (CoQ) (Донченко, 1988; Лукьянова, 1997; Крылов, Лукьянова, 2004). Таким образом, применение пчелиного яда и убихинона-10 в качестве терапевтических средств при травме периферических нервов может способствовать процессу регенерации.
Цель и задачи исследования. Целью работы было исследование динамики репаративной регенерации периферических нервов: кожного (п. saphenus) и седалищного (п. ischiadicus) у крыс при неполном и полном передавливании на участках длиной 2 мм или 4 мм, и ее модификации пчелиным ядом и убихиноном-10.
В задачи работы входило:
1. Исследовать восстановление характеристик вызванных потенциалов (скорости, амплитуды, формы ВП) в седалищном нерве у крыс и лягушек после неполного пережатия нерва.
2. Изучить восстановление характеристик вызванных потенциалов (скорости, амплитуды, формы) кожного нерва крыс после полного пережатия на участках различной длины, и восстановление активности нерва при раздражении механорецепторов кожи.
3. Исследовать динамику изменения количества нервных волокон в дистальном участке кожного нерва крыс после альтерации на участках различной длины.
4. Дать количественную и качественную характеристику нейронов спинномозговых узлов (СМУ) L3 и L4 крыс после полного пережатия кожного нерва на участках различной длины в динамике регенерации.
5. Изучить модифицирующее воздействие пчелиного яда и убихинона на репаративную регенерацию кожного нерва крыс.
Научная новизна. Впервые проведено исследование деструктивных и регенеративных процессов, происходящих в периферических нервах и СМУ у крыс после альтерации нервов полным пережатием на участках различной длины. Обнаружено влияние степени тяжести травмы на восстановление миелиновых оболочек в период до 30 суток после травмы и отсутствие различий в динамике деструктивных процессов в СМУ L3 и L4, восстановления количества нервных волокон в альтерированном нерве после травм различной степени тяжести. Показано уменьшение количества нейронов СМУ L3 и L4 до 10 суток после альтерации нерва и отсутствие изменения количества нейронов в последующий период до 50 суток после травмы. Установлено стимулирующее воздействие пчелиного яда и убихинона-10 на восстановление миелиновых оболочек регенерирующих волокон.
Научно-практическая значимость. Выявленные закономерности протекания регенеративных и деструктивных процессов в кожном нерве и СМУ L3 и L4 после полного пережатия нерва на участках различной длины в дальнейшем могут быть применены для моделирования травм периферических нервов в исследовательских работах медико-биологических отраслей науки, а также в учебной работе - при изучении соответствующих разделов учебных дисциплин физиологии, патофизиологии, гистологии, человека и животных в учебных программах биологических, сельскохозяйственных и медицинских вузов. Использованная модель репаративной регенерации кожного нерва, выполненная в стандартизированных условиях, может быть применена для оценки эффективности репаративного процесса с помощью различных терапевтических воздействий.
Полученные результаты позволяют обосновать применение пчелиного яда и убихинона-10 в медицинской практике при терапии травм периферических нервов.
Основные положения, выносимые на защиту:
Механическое пережатие седалищного нерва крыс и лягушек и кожного нерва крыс, вызывающее полный разрыв осевых цилиндров нервных волокон на участке альтерации, приводит к дегенеративным изменениям в нейронах и спинномозговых узлах, выражающихся на 10-е сутки после альтерации в максимальном снижении количества миелиновых волокон дистального участка травмированного нерва, а также снижением амплитуды и скорости вызванных потенциалов в нерве.
При полном пережатии различной степени тяжести (на участках различной длины) кожного нерва крыс различия в регенеративных процессах обнаружены в динамике восстановления миелиновых оболочек нервных волокон до 30 суток после травмы.
Увеличение количества миелинизированных волокон в участке нерва, расположенном дистальнее места травмы, скорости прорастания поврежденных нервных волокон к коже после альтерации нерва на участках различной длины, регистрируемые в период 10-50 суток, не зависят от степени тяжести травмы (2 или 4 мм).
Применение пчелиного яда и убихинона-10 стимулирует процесс миелинизации травмированных волокон кожного нерва крыс.
Апробация работы. Материалы, представленные в диссертации, доложены на XIII Международном совещании и VI школе по эволюционной физиологии, посвященным памяти академика JI.A. Орбели и 50-летию Института эволюционной физиологии и биохимии им. И.М. Сеченова (Санкт-Петербург, 2006); на Научно-практической конференции с международным участием «Актуальные вопросы эволюционной, возрастной и экологической морфологии» (Белгород, 2006); на расширенном заседании кафедры физиологии и биохимии человека и животных, 2007,
Структура и объем диссертации. Материалы диссертации изложены на 101 странице машинописного текста, иллюстрированы 2 таблицами и 29 рисунками. Работа состоит из введения, обзора литературы, характеристики материалов и методов исследования, результатов исследования, обсуждения, заключения, выводов и списка литературы, содержащего 165 источников, их них 77 на иностранных языках.
